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　　小鼠CD206分子(CD206)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

　　BS-9397 小鼠CD206分子(CD206)ELISA試劑盒

　　一、試劑盒基本信息

　　檢測原理

　　采用雙抗體夾心法：預(yù)包被抗CD206抗體的微孔板與樣本中的靶標(biāo)結(jié)合后，加入生物素化二抗及SABC復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后測定450nm吸光度，濃度與OD值呈正比。

　　組分清單

　　預(yù)包被酶標(biāo)板(8×12孔)

　　標(biāo)準(zhǔn)品(0.312-20ng/mL，需現(xiàn)配現(xiàn)用)

　　生物素化檢測抗體(100×濃縮液)

　　TMB顯色液(A/B組分，避光保存)

　　20×濃縮洗滌液(含防腐劑)

　　終止液(2M硫酸)

　　二、實(shí)驗(yàn)操作步驟

　　1. 樣本準(zhǔn)備

　　血清/血漿：采集后3000rpm離心10分鐘，2-8℃保存≤48小時(shí)，長期需-80℃凍存(避免反復(fù)凍融)。

　　組織勻漿：按1:9比例加入PBS勻漿，4℃離心取上清。

　　2. 檢測流程

　　加樣：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(建議復(fù)孔)，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌：用1×洗滌液洗板5次，拍干。

　　加抗體：每孔加入100μL生物素化抗體(1:100稀釋)，37℃孵育60分鐘。

　　顯色：加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘，終止液終止反應(yīng)。

　　三、注意事項(xiàng)

　　時(shí)間控制：首尾孔加樣間隔≤30分鐘，避免預(yù)孵育時(shí)間差異。

　　試劑保存：標(biāo)準(zhǔn)品需-20℃保存，濃縮洗滌液使用前需37℃助溶。

　　數(shù)據(jù)有效性：標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.95，樣本OD值需落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。

　　四、結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/mL)為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，擬合四參數(shù)方程計(jì)算樣本濃度。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，如需具體產(chǎn)品資料請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌商。

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