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以下是?人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒?的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明，綜合各品牌試劑盒通用操作流程及注意事項(xiàng)整理：
BS-1395人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成?
預(yù)包被微孔板?：抗IDUA抗體包被的96孔或48孔板?。
標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度梯度為0.156-10 ng/mL(具體以說(shuō)明書為準(zhǔn))?。
檢測(cè)抗體?：HRP標(biāo)記的IDUA抗體?。
底物溶液?：TMB顯色液?。
終止液?：酸性溶液(如2M H?SO?)?。
洗滌緩沖液?：20-25倍濃縮液，需稀釋使用?。
二、樣本處理?
適用樣本?：血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細(xì)胞裂解液、組織勻漿等?。
預(yù)處理要求?：
血清/血漿：離心去除雜質(zhì)(1000×g，15-20分鐘)，避免溶血?。
組織樣本：勻漿后離心取上清?。
保存條件?：短期2-8℃，長(zhǎng)期需-20℃凍存，避免反復(fù)凍融?。
三、實(shí)驗(yàn)步驟?
試劑平衡?：所有組分室溫平衡15-30分鐘(TMB需避光)?。
加樣?：
標(biāo)準(zhǔn)品/樣本每孔加50-100μL，復(fù)孔建議?。
空白孔加稀釋液對(duì)照?。
孵育?：37℃避光孵育1-5小時(shí)(具體時(shí)間參考說(shuō)明書)?。
洗滌?：
棄液后每孔加洗滌液300μL，靜置30秒后拍干，重復(fù)5次?。
加檢測(cè)抗體?：每孔加HRP標(biāo)記抗體100μL，37℃孵育1小時(shí)?。
顯色?：
加TMB底物100μL，避光反應(yīng)10-30分鐘(顯藍(lán)色)?。
加終止液50μL，顏色轉(zhuǎn)為黃色?。
檢測(cè)?：450nm波長(zhǎng)測(cè)OD值(參考630nm校正)?。
四、數(shù)據(jù)分析?
標(biāo)準(zhǔn)曲線?：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，擬合四參數(shù)曲線?。
濃度計(jì)算?：樣本OD值代入曲線方程，乘以稀釋倍數(shù)?。
五、注意事項(xiàng)?
質(zhì)量控制?：
每板需做標(biāo)準(zhǔn)曲線及復(fù)孔，CV%應(yīng)<10%?。
樣本OD值超范圍時(shí)需稀釋后重測(cè)?。
操作細(xì)節(jié)?：
避免板孔干燥，孵育時(shí)覆蓋封板膜?。
加樣需精準(zhǔn)，建議使用多道移液器?。
保存條件?：
未用板條密封保存于2-8℃或-20℃?。
底物避光，終止液腐蝕性需防護(hù)?。
六、技術(shù)參數(shù)?
檢測(cè)范圍?：0.156-10 ng/mL(靈敏度0.039 ng/mL)?。
精密度?：板內(nèi)CV<8%，板間CV<10%?。
注：以上資料僅供參考，如需具體品牌說(shuō)明，可聯(lián)系供應(yīng)商獲取完整文檔?。
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